殺稻瘟菌素 S HCl(Blasticidin S HCl (10 mg/mL))
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殺稻瘟菌素 S 是從灰色鏈霉菌中分離出的一種肽基核苷類抗生素。它是細菌和真核細胞中蛋白合成的強效抑制劑,同時對真菌、線蟲和腫瘤細胞也具有活性。殺稻瘟菌素 S 通過阻斷釋放因子誘導(dǎo)的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽鍵形成。可用作哺乳動物細胞和細菌細胞的選擇劑。建議的工作濃度介于 1 至 30 μg/mL 之間,具體取決于細胞系,用于細菌選擇的濃度為 25–100 μg/mL。迅速發(fā)生細胞死亡,可在不到一周內(nèi)生成對殺稻瘟菌素穩(wěn)定耐藥的哺乳動物細胞系。
攜帶 BSR 和 BSD(分別從蠟樣芽孢桿菌 K55-S 和土曲霉中分離出)可獲得殺稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶,該酶催化殺稻瘟菌素 S 轉(zhuǎn)化為脫氨基羥基殺稻瘟菌素 S。脫氨基羥基稻瘟菌素 S 是殺稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不與原核或真核核糖體相互作用,也不抑制原核或真核核糖體。BSD 抗性基因也編碼殺稻瘟菌素 S 脫氨酶,該酶催化與 BSR 脫氨酶類似的反應(yīng)。為了進行細菌選擇,LB 培養(yǎng)基的鹽含量必須保持低水平(低于 90 mM),pH 值不應(yīng)超過7.0,以維持殺稻瘟菌素 S 的活性。建議使用殺菌曲線,以確定殺滅非耐藥性細胞的殺稻瘟菌素 S 有效濃度下限。
應(yīng)用
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